天津地区规模化生猪场产肠毒素大肠杆菌的分离鉴定

doi:10.19640/j.cnki.jtau.2018.03.011

天津农学院学报 ›› 2018, Vol. 25 ›› Issue (3): 52-56.doi: 10.19640/j.cnki.jtau.2018.03.011

天津地区规模化生猪场产肠毒素大肠杆菌的分离鉴定

姜轩, 刘梦月, 付超, 马吉飞, 赵瑞利^通信作者, 石青青, 胡烨, 崔君

天津农学院动物科学与动物医学学院,天津 300384

收稿日期:2018-04-27 出版日期:2018-09-20 发布日期:2019-11-12
通讯作者: 赵瑞利（1979-）,女,副教授,博士,研究方向：分子病原细菌学。E-mail：zhaoruili1109@126.com。
作者简介:姜轩（1995-）,女,硕士在读,研究方向：分子病原细菌学。E-mail：806440849@qq.com。
基金资助:
天津市高校“中青年骨干创新人才培养计划”项目（无编号）; 天津市“131”创新型人才资助项目（无编号）; 天津市生猪产业技术体系创新团队-猪细菌病岗位项目（ITTPRS2017004）; 天津市应用基础与前沿技术研究计划一般项目（14JCYBJ30000）

Isolation and identification of enterotoxigenic Escherichia coli from large scale pig farms in Tianjin area

JIANG Xuan, LIU Meng-yue, FU Chao, MA Ji-fei, ZHAO Rui-li^{Corresponding Author}, SHI Qing-qing, HU Ye, CUI Jun

College of Animal Science and Veterinary Medicine, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China

Received:2018-04-27 Online:2018-09-20 Published:2019-11-12

摘要/Abstract

摘要： 具有特殊血清型的大肠杆菌对人与动物肠道有不同程度的致病性,其中以产肠毒素大肠杆菌（ETEC）危害较为严重。从天津地区规模化养猪场采集 15 例腹泻病猪的直肠拭子样品,接种到 MH、麦康凯、伊红美蓝琼脂培养基进行细菌培养及革兰染色镜检。选取培养基上形态不同的菌落进行生化试验,16S rRNA 序列测定及 BLAST 分析,结果分离到的10株肠杆菌科细菌与大肠杆菌的同源率达 99.6%。合成大肠杆菌肠毒素 ST1、ST2、LT1、IR1 特异性引物,PCR 结果检测到产 LT1 毒素、产 LT1 和 ST1 毒素及产 ST1 肠毒素的3株大肠杆菌。对分离出的产肠毒素 LTI、ST1 的菌株进行药敏试验,结果表明产肠毒素大肠杆菌对新霉素、克林霉素、庆大霉素、青霉素、头孢曲松、丁胺卡那、头孢呋辛、氟苯尼考敏感,为临床产肠毒素大肠杆菌的监测与防控提供依据。

关键词: 产肠毒素大肠杆菌（ETEC）, 腹泻, 分离鉴定, 16S rRNA

Abstract: Escherichia coli with special serotype has different degrees of pathogenicity to human and animal intestines, among which enterotoxigenic Escherichia coli（ETEC）is more serious. Rectal swabs samples of 15 diarrhoea pigs in Tianjin area were collected and inoculated with MH, MacConkey Agar and eosin-methylene blue agar for bacterial culture and Gram staining microscopy.The colonies with different shape on the medium were tested for biochemical tests, 16S rRNA sequencing and BLAST analysis. The homology rate of 10 strains of Enterobacteriaceae and Escherichia coli was 99.6%. The specific primers of Escherichia coli enterotoxin ST1, ST2, LT1 and IR1 were synthesized. PCR results showed that 3 strains of Escherichia coli producing LT1 toxin, LT1 and ST1 toxin, and ST1 enterotoxin were isolated. The antimicrobial susceptibility test of isolated strains of enterotoxin LTI and ST1 showed that enterotoxigenic Escherichia coli was sensitive to neomycin, clindamycin, gentamicin, penicillin, ceftriaxone, amikacin, cefuroxime and florfenicol, which provided a basis for the monitoring and prevention of ETEC.

Key words: enterotoxigenic Escherichia coli（ETEC）, diarrhea, isolation and identification, 16S rRNA

中图分类号:

S852.611

姜轩, 刘梦月, 付超, 马吉飞, 赵瑞利, 石青青, 胡烨, 崔君. 天津地区规模化生猪场产肠毒素大肠杆菌的分离鉴定[J]. 天津农学院学报, 2018, 25(3): 52-56.

JIANG Xuan, LIU Meng-yue, FU Chao, MA Ji-fei, ZHAO Rui-li, SHI Qing-qing, HU Ye, CUI Jun. Isolation and identification of enterotoxigenic Escherichia coli from large scale pig farms in Tianjin area[J]. Journal of Tianjin Agricultural University, 2018, 25(3): 52-56.

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