小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定

天津农学院学报 ›› 2014, Vol. 21 ›› Issue (1): 1-4.

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小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定

代阳¹, 王轶敏^1,2, 刘新峰¹, 樊晗璐¹, 李吉霞¹, 郭宏¹, 丁向彬^{1,通信作者}

1. 天津农学院动物科学与动物医学学院,天津 300384;
2. 西北农林科技大学生物工程研究所,陕西杨凌 712100

收稿日期:2013-12-19 发布日期:2019-10-21
通讯作者: 丁向彬（1978-）,男,河南南阳人,副教授,博士,研究方向为动物胚胎工程与繁殖生物技术。E-mail: xiangbinding@163.com。
作者简介:代阳（1988-）,女,内蒙古通辽人,硕士在读,研究方向为动物胚胎与转基因工程。E-mail: aq19881209@163.com。
基金资助:
国家自然科学基金项目“牛骨骼肌卫星细胞成肌分化相关miRNAs的鉴定和功能研究”（31201021）; 天津市自然科学基金项目“microRNA-1对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的调控作用研究”（13JCQNJC14600）

Isolated Culture and Identification of Mouse Skeletal Muscle Satellite Cells

DAI Yang¹, WANG Yi-min^1,2, LIU Xin-feng¹, FAN Han-lu¹, LI Ji-xia¹, GUO Hong¹, DING Xiang-bin^{1,Corresponding Author}

1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China;
2. Institute of Bioengineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China

Received:2013-12-19 Published:2019-10-21

摘要/Abstract

摘要： 采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离小鼠骨骼肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化,并利用RT-PCR和免疫荧光染色方法对分化前后细胞的标志基因进行鉴定。结果显示：分离出的肌卫星细胞生长状态良好,RT-PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,诱导分化形成肌管后,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究成功从小鼠肌肉组织中分离出了肌卫星细胞,并具有很好的体外分化能力,可以为肌肉的发育分化和损伤修复研究提供良好的细胞模型。

关键词: 小鼠, 骨骼肌卫星细胞, 细胞培养, 鉴定

Abstract: In this study, mouse skeletal muscle satellite cells were isolated by collagenase and trypsinase digestion method. Then the satellite cells were purified and induced to differentiate into myotubes, and the marker genes of the cells before or after the differentiation were detected by RT-PCR and immunocytochemistry technology. The results show that the isolated muscle satellite cells were healthy, and expressed the marker genes of paired protein box (Pax7) and myogenic differentiation antigen (MyoD). After inducing to the myotubes, myogenin (MyoG) and myosin heavy chain (MHC)showed positive expression. The results indicate that mouse skeletal muscle satellite cells of high purity, which can provide cell sources for muscle development and damage repair study, are successfully isolated.

Key words: mouse, skeletal muscle satellite cell, cell culture, identification

中图分类号:

Q813.1

代阳, 王轶敏, 刘新峰, 樊晗璐, 李吉霞, 郭宏, 丁向彬. 小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定[J]. 天津农学院学报, 2014, 21(1): 1-4.

DAI Yang, WANG Yi-min, LIU Xin-feng, FAN Han-lu, LI Ji-xia, GUO Hong, DING Xiang-bin. Isolated Culture and Identification of Mouse Skeletal Muscle Satellite Cells[J]. Journal of Tianjin Agricultural University, 2014, 21(1): 1-4.

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参考文献

[1] Sacco A,Doyonnas R Kraft P,Vitorovic S,et al. Self-renewal and expansion of single transplanted muscle stem cells[J]. Nature,2008,456(7221):502-506.
[2] Mauro A.Satellite cells of skeletal muscle fibers[J]. J Biophys Biochem Cytol,1961,9(2):493-495.
[3] 张蔚菁,贾懿劼,田京. 肌卫星细胞增殖及分化影响因素研究进展[J]. 国际骨科学杂志,2013,34(2): 104-106.
[4] Cardasis C A,Cooper G W.An analysis of nuclear numbers in individual muscle fibers during differentiation and growth:a satellite cell-muscle fiber growth unit[J]. J Exp Zool,1975,191(3):347-358.
[5] Bischoff R,Heintz C.Enhancement of skeletal muscle regeneration[J]. Dev Dyn,1994,201(1):41-54.
[6] 庄新杰,严为巧,路易,等. 水牛骨骼肌卫星细胞的分离培养和生物学特性分析[J]. 黑龙江畜牧兽医,2009(11):16-18.
[7] Qu Z,Balkir L,van Deutekom J C,et al. Development of approaches to improve cell survival in myoblast transfer therapy[J]. The Journal of Cell Biology,1998,142(5):1257-1267.
[8] Mesires N T,Doumit M E.Satellite cell proliferation and differentiation during postnatal growth of porcine skeletal muscle[J]. Am J Physiol Cell Physiol,2002,282(4):899-906.
[9] 朱铠,过常发,王春生,等. 小鼠成体骨骼肌卫星细胞提取及纯化方法的改进[J]. 中国分子心脏病学杂志,2011,11(2):113-116.
[10] Pallafacchina G,Francois S,Regnault B,et al.An adult tissue specific stem cell in its niche:a gene profiling analysis of in vivo quiescent and activated muscle satellite cells[J]. Stem Cell Res,2010,4(2):77-91.
[11] Seale P,Sabourin L A,Girgis-Gabardo A,et al.Pax7 is required for the specification of myogenic satellite cells[J]. Cell,2000,102(6):777-786.
[12] Gizak A,Wrobel E,Moraczewski J,et al.Changes in subcellular localization of fructose 1, 6-bisphosphatase during differentiation of isolated muscle satellite cells[J]. FEBS Lett,2006,580(17):4042-4046.
[13] Sabourin L A,Rudnicki M A.The molecular regulation of myogenesis[J]. Clin Genet,2000,57(1):16-25.
[14] Zammit P S,Golding J P,Nagata Y,et al.Muscle satellite cells adopt divergent fates:a mechanism for self-renewal[J]. J Cell Biol,2004,166:347-357.

[1]	章阳, 陆贺港, 游鹏智, 李晓雁, 黄海东. 菌株ZYRH-19的筛选鉴定及其合成韦兰胶的特性研究[J]. 天津农学院学报, 2024, 31(1): 36-40.
[2]	张辰, 祖国浩, 何亮, 王晨茜, 焦克龙, 谷希树. 中国天津地区发现果蝇毛锤角细蜂新纪录[J]. 天津农学院学报, 2023, 30(6): 1-5.
[3]	陈家乐, 何金灵, 杜荣起, 李丹若, 金天明, 张东超. 鸡源大肠杆菌的分离鉴定及其致病性分析[J]. 天津农学院学报, 2023, 30(5): 23-29.
[4]	胡蕾, 王轶敏, 张林林, 李新, 郭益文, 丁向彬. UCH-L3通过影响RAD51调控牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化[J]. 天津农学院学报, 2023, 30(2): 1-6.
[5]	于帅, 刘利华, 李永仁, 郭永军, 陈丽梅. 天津沿海牡蛎的形态学观察及分子鉴定[J]. 天津农学院学报, 2023, 30(1): 46-50.
[6]	蓝咫林, 刘倩影, 俞泳儿, 陈淳, 刘铮辉, 徐军. 番泻叶致小鼠急性腹泻模型的建立[J]. 天津农学院学报, 2023, 30(1): 70-73.
[7]	庞月, 郭美玲, 刘芯睿, 薛淑霞, 孙金生. 锦鲤源维氏气单胞菌的鉴定及致病性分析[J]. 天津农学院学报, 2022, 29(4): 36-42.
[8]	刘文军, 尚东维, 于小涵, 崔培, 杨燕菁, 孙金辉. 线纹海马副溶血弧菌的分离鉴定及药物筛选[J]. 天津农学院学报, 2022, 29(1): 52-56.
[9]	杨雪梅, 苟攀宁, 张云翔, 陆雪兰, 贺艳婷, 田小卫. 车前子内生细菌的分离、鉴定及生防作用研究[J]. 天津农学院学报, 2021, 28(3): 37-41.
[10]	丁巧玲, 刘舒月, 孟泽, 李建军. 犬源伪中间型葡萄球菌的分离鉴定及药敏特性[J]. 天津农学院学报, 2021, 28(3): 42-45.
[11]	杜汉宇, 葛成菲, 汪丽丽, 胡烨. 枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其特性研究[J]. 天津农学院学报, 2020, 27(3): 53-56.
[12]	余海军, 黄鑫, 张钰莹, 周晶晶, 田召志, 陈佳林, 王茜. 探索DNA条形码对哈摇蚊类群部分属物种鉴定的有效性[J]. 天津农学院学报, 2020, 27(3): 57-61.
[13]	晚安琪, 蔺晓云, 黄亮, 班立桐, 孙宁, 王玉, 李奕葶. 一株侧耳属野生菌的分离鉴定及初步驯化栽培[J]. 天津农学院学报, 2020, 27(2): 28-30.
[14]	杜荣起, 任君, 乔启, 张晴, 刘燕霏, 杨建德. 不同溶血性大肠杆菌的分离与鉴定[J]. 天津农学院学报, 2020, 27(1): 61-64.
[15]	刘希旻, 杨海霞, 黄灵曦, 李晓雁, 权桂芝, 杨红澎, 黄海东. 一株高效解磷假单胞菌的分离鉴定及解磷特性[J]. 天津农学院学报, 2019, 26(4): 49-53.

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Isolated Culture and Identification of Mouse Skeletal Muscle Satellite Cells

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